Acesta este un tip de enzimă care catalizează (accelerează) reacțiile în care se fac transferuri de grupări fosfat, în special hexokinaza funcționează la fosforilarea glucozei pentru a forma un nou compus numit „glucoză-6-fosfat” (deoarece grupul fosfor este localizat pe numărul de carbon 6 al glucozei). În reacția biochimică că acțiunea hexokinazei este necesară, este procesul de glicoliză sau degradarea glucozei în mod specific în mușchi și alte țesuturi, cum ar fi creierul, celulele roșii din sânge și, printre altele, degradarea glucozei are ca rezultat producerea de acid piruvic sau piruvat; reacția glicolizei invers, are ca rezultat formarea glucozei din compuși necarbonici sau glucogenogeneză și apare la nivel hepatic.
Acum, această enzimă a fost denumită apoi hexokinază datorită semnificației etimologice a cuvântului, „kinază” indică faptul că enzima produce fosforilare (adaugă o grupare fosforosă la reacție), iar „hexo” se referă la reacția fiind date în hexoze, acestea sunt un grup de carbohidrați sau zaharuri care sunt compuse din 6 atomi de carbon, în cadrul acestui grup sunt glucoza, fructoza, manoza, printre altele. Unul dintre compușii chimici esențiali pentru buna funcționare a hexokinazei este magneziul, acesta inhibă încărcăturile negative de oxigen sau ATP, facilitând astfel combinarea grupării fosfat cu hexoză, din acest motiv nu funcționează fără prezența magneziului.
Hexokinaza are o izoenzimă (sunt diferite, dar îndeplinesc aceeași funcție), aceasta se numește glucokinază, diferența dintre cele două este locul de localizare, hexokinaza se găsește în toate țesuturile celulare care necesită glucoză ca sursă de energie, în timp ce că glucokinaza este localizată numai în hepatocite, acestea sunt celule care alcătuiesc ceea ce este țesutul hepatic(ficat). Ambele îndeplinesc aceeași funcție, fosforilează glucoza astfel încât să nu scape din celulă, prinzând-o pentru a executa procesul de glicoliză, o altă diferență importantă între ambele enzime este compusul care îi inhibă funcția, hexokinaza nu mai funcționează dacă este posedată glucoză-6-fosfat în concentrații mari, în timp ce glucokinaza este inhibată de cantități mari de fructoză-6-fosfat.